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當(dāng)前位置:首頁(yè)產(chǎn)品中心生化檢測(cè)試劑盒-常量法蛋白含量測(cè)定系列BC3185-100T/96S雙縮脲法蛋白含量測(cè)定試劑盒 微量法

雙縮脲法蛋白含量測(cè)定試劑盒 微量法
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

儲(chǔ)存條件
-20℃
中文名稱(chēng)
雙縮脲法蛋白含量測(cè)定試劑盒 微量法
有效期
6個(gè)月
單位

英文名稱(chēng)
Protein Content Assay Kit(Biuret Method)
別名
雙縮脲法蛋白含量測(cè)定試劑盒 雙縮脲法蛋白含量測(cè)試盒
檢測(cè)方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
規(guī)格
100T/96S

產(chǎn)品型號(hào):BC3185-100T/96S

更新時(shí)間:2025-08-23

廠(chǎng)商性質(zhì):生產(chǎn)廠(chǎng)家

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雙縮脲法蛋白含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
微量法
貨號(hào): BC3185
規(guī)格: 100T/96S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱(chēng)規(guī)格保存條件
提取液自備-
試劑一液體20 mL×1瓶2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品液體1 mL×1,5 mg/mL-20℃保存

溶液的配制:
提取液:自備。根據(jù)需要選用酶提取緩沖液或者蒸餾水或者生理鹽水
產(chǎn)品說(shuō)明:
樣本可溶性蛋白質(zhì)含量常常用于酶活性計(jì)算。此外,可溶性蛋白質(zhì)含量也用于食品等質(zhì)量分析。
強(qiáng)堿性溶液中,雙縮脲與CuSO4形成紫色絡(luò)合物;紫色絡(luò)合物顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比,而與蛋白質(zhì)分子量及氨基酸成分無(wú)關(guān),故可用來(lái)測(cè)定蛋白質(zhì)含量。該方法適用于蛋白質(zhì)濃度高的樣本,尤其是動(dòng)物材料。
技術(shù)指標(biāo):
低檢出限:0.1718 mg/mL
線(xiàn)性范圍:0.25-12 mg/mL
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
自備的儀器和用品
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、離心機(jī)移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件
一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn)
1、液體樣本:澄清無(wú)色液體樣本可以直接測(cè)定。
2、組織樣本:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL提取液)冰浴勻漿,10000rpm4℃離心10min,取上清,即待測(cè)液。(動(dòng)物樣本常常需要稀釋?zhuān)?/span>
3、細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后8000g4℃,離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。
二、測(cè)定步驟

  1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到540nm,蒸餾水調(diào)零。

  2. 空白管:取0.5mL EP管,加入40μL蒸餾水,200μL試劑一,混勻后室溫靜置15min,取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板,540nm比色,記為A空白管。

  3. 標(biāo)準(zhǔn)管:取0.5mL EP管,加入40μL標(biāo)準(zhǔn)液,200μL試劑一,混勻后室溫靜置15min,取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板,540nm比色,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。

  4. 測(cè)定管:取0.5mL EP管,加入40μL待測(cè)液,200μL試劑一,混勻后室溫靜置15min,取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板,540nm比色,記為A測(cè)定管。

注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定1-2次。

注意事項(xiàng):

  1. 樣本蛋白濃度須在0.25~12mg/mL范圍內(nèi),低于0.25mg/mL不能用此法,高于12mg/mL須做相應(yīng)稀釋。因此測(cè)定前用1~2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),確保蛋白濃度在0.25~12mg/mL范圍內(nèi)。

  2. 如果吸光值大于0.44,則需要將樣本用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

  3. 待測(cè)樣本蛋白提取可用生理鹽水、雙蒸水或不含蛋白的PBS提取。該法受硫酸銨、Tris緩沖液干擾,提取液中應(yīng)不含這些物質(zhì);否則改用BCA蛋白質(zhì)含量測(cè)定試劑盒。

雙縮脲法蛋白含量測(cè)定試劑盒 微量法 雙縮脲法蛋白含量測(cè)定試劑盒 微量法

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