焦磷酸化酶（UGP）檢測(cè)試劑盒糖原

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

儲(chǔ)存條件
-20℃
中文名稱
焦磷酸化酶（UGP）檢測(cè)試劑盒糖原
有效期
6個(gè)月
單位
盒
英文名稱
UDP-glucose pyrophosphosphprylase(UGP) Activity Assay Kit
檢測(cè)方法
紫外分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S

產(chǎn)品型號(hào)：BC3360-50T/48S

更新時(shí)間：2025-08-26

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問(wèn) 量：1603

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測(cè)試劑盒-常量法

谷胱甘肽過(guò)氧化物酶4（GPX4）活性檢測(cè) 總谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測(cè) α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測(cè) 硫代葡萄糖苷含量檢測(cè) 生物堿含量檢測(cè) 總氧化狀態(tài)（TOS）檢測(cè) α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測(cè) 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測(cè) 水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力檢測(cè) 植物銨態(tài)氮含量檢測(cè)試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測(cè)試劑盒細(xì)胞酸性磷酸酶細(xì)胞堿性磷酸酶果膠系列轉(zhuǎn)氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測(cè)定系列其它系列信號(hào)系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環(huán)系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

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產(chǎn)品介紹

UDPG焦磷酸化酶（UGP）活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

紫外分光光度法

注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書(shū)操作。

貨號(hào)：BC3360

規(guī)格：50T/48S

產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
提取液	液體55 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	粉劑×1瓶	-20℃保存
試劑二	粉劑×2瓶	2-8℃保存
試劑三	粉劑×2支	-20℃保存
試劑四	粉劑×2支	-20℃保存
試劑五	液體5 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑六	液體15 mL×1瓶	2-8℃保存

溶液的配制：

1. 試劑一：臨用前加30mL蒸餾水充分溶解；用不完的試劑分裝后-20℃可保存4周，禁止反復(fù)凍融。

2. 試劑二：臨用前取1瓶加2.5 mL蒸餾水充分溶解；用不完的試劑2-8℃保存2周。

3. 試劑三：臨用前取1支加0.7 mL蒸餾水充分溶解；用不完的試劑分裝后-20℃可保存4周，禁止反復(fù)凍融。

4. 試劑四：臨用前取1支加1 mL蒸餾水充分溶解；用不完的試劑分裝后-20℃可保存2周，禁止反復(fù)凍融。

5. 工作液的配制：將試劑一：試劑二：試劑三：試劑四：試劑五：試劑六按體積比=600：100：20：40：100：250混合，現(xiàn)用現(xiàn)配。

產(chǎn)品說(shuō)明：

尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶（UDP-glucose pyrophosphosphprylase，UGP，EC 2.7.7.9）在自然界廣泛分布。在葡萄糖合成糖原前催化葡萄糖活化，將1-磷酸葡萄糖與UTP分子合成為UDP-葡萄糖（UDPG），UDPG是高等植物和動(dòng)物中主要活化酶的形式，作為葡萄糖基供體參與糖原、蔗糖、纖維素等的合成代謝。

UGP可逆的催化生成1-磷酸葡萄糖，其在磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶作用下將NADP轉(zhuǎn)化為NADPH，UGP活性可以用340nm的吸光值的變化來(lái)反應(yīng)。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、1mL石英比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。

操作步驟：

一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）

組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液）進(jìn)行冰浴勻漿，然后10000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。

細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（10⁴個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL提取液），冰浴超聲破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后10000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。

血清等液體：直接檢測(cè)。

二、測(cè)定步驟

1、紫外分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm，蒸餾水調(diào)零。

2、操作表：

試劑名稱	空白管	測(cè)定管
樣本（µL）		100
工作液（µL）	900	900
蒸餾水（µL）	100	-
在1mL石英比色皿中分別加入上述試劑，充分混勻后于340nm處測(cè)定10s時(shí)的吸光值A1，迅速置于37℃水浴鍋或者培養(yǎng)箱反應(yīng)5min，拿出迅速擦干測(cè)定310s時(shí)的吸光值A2，計(jì)算ΔA測(cè)定管= A2測(cè)定-A1測(cè)定，ΔA空白管=A2空白-A1空白，ΔA=ΔA測(cè)定管-ΔA空白管（空白管只需做1-2次）。

三、UGP酶活計(jì)算

1. 按照樣本蛋白濃度計(jì)算

酶活單位定義：每毫克組織蛋白每分鐘產(chǎn)生1nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。

UGP（U/mg prot）=[ΔA÷（ε×d）×V反總×10⁹]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.54×ΔA÷Cpr

2. 按照樣本質(zhì)量計(jì)算

酶活單位定義：每克組織每分鐘產(chǎn)生1nmol 的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。

UGP（U/g 質(zhì)量）=[ΔA÷（ε×d）×V反總×10⁹]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.54×ΔA÷W

3. 按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

酶活單位定義：每10⁴個(gè)細(xì)胞每分鐘產(chǎn)生1nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。

UGP（U/10⁴ cell）=[ΔA÷（ε×d）×V反總×10⁹]÷(500×V樣÷V樣總) ÷T=0.643×ΔA

4. 按照液體體積計(jì)算

酶活單位定義：每毫升液體每分鐘產(chǎn)生1nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。

UGP（U/mL）=[ΔA÷（ε×d）×V反總×10⁹]÷V樣÷T=321.54×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，1×10^-3L；ε：NADPH摩爾消光系數(shù)，6.22×10³L/mol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.1mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；T：反應(yīng)時(shí)間，5min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g ；500：細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù)，500萬(wàn)；10⁹：?jiǎn)挝粨Q算系數(shù)，1mol=10⁹nmol。