6-磷酸葡萄糖酸
脫氫酶（6PGDH）活性檢測試劑盒說明書
微量法
貨號: BC2105
規格: 100T/96S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前配制，加入2.2 mL試劑一，混勻；

2. 試劑三：臨用前配制，加入2 mL試劑一，混勻。

產品說明：
磷酸戊糖途徑途徑中6-磷酸葡萄糖脫氫酶（G6PDH）和6-磷酸葡萄糖酸脫氫酶（6PGDH）依次催化NADPH合成，與能量的平衡、生長速率和細胞活力等密切相關。此外，6PGDH逆境生理中具有重要作用。
6PGDH催化6-磷酸葡萄糖酸和NADP⁺生成NADPH，NADPH在340nm有特征吸收峰，而NADP⁺沒有；通過測定340nm吸光度增加速率，計算6PGDH活性。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
低溫離心機、水浴鍋、可調式移液槍、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔UV板、研缽/勻漿器、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
注意事項：

1. 試劑二和試劑三須現配現用，當天未用完試劑保存在4℃，可保存1周。

2. 樣本處理等過程均需要在冰上進行，且須在提取當日完成酶活性測定，粗酶液避免反復凍融；

3. 若樣本初始（0s）讀值大于0.5且ΔA測定小于0.1，可嘗試將樣本進行稀釋后測定。

4. 使用96孔板測定時，可根據樣本數量將試劑一（預熱后）、二、三預混為工作液，因是根據反應速率計算酶活，為保證每個樣本的反應時間盡量一致不推薦同時測過多樣本。

實驗實例：

1. 稱約0.1g腎臟組織，加入1mL試劑一，冰上充分研磨，10000rpm 4℃離心10min，取上清稀釋5倍，用微量石英比色皿測得計算ΔA測定=A2測定-A1測定=0.4866-0.3035=0.1831，ΔA空白=A2空白-A1空白=0.0325-0.0269=0.0056，按樣本質量計算酶活得：6PGDH酶活性(U/g 質量) =536×(ΔA測定-ΔA空白)÷W×5（稀釋倍數）=4757 U/g 質量。

相關發表文獻：

1. Wu S, Wang H, Li Y, et al. Transcription factor YY1 promotes cell proliferation by directly activating the pentose phosphate pathway[J]. Cancer research, 2018, 78(16): 4549-4562.

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