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幾丁質(zhì)酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

儲(chǔ)存條件
2-8℃
中文名稱
幾丁質(zhì)酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法
有效期
6個(gè)月
單位

英文名稱
Chitinase Activity Assay Kit
別名
幾丁質(zhì)酶測(cè)定試劑盒 幾丁質(zhì)酶測(cè)定測(cè)試
檢測(cè)方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
規(guī)格
100T/48S

產(chǎn)品型號(hào):BC0825-100T/48S

更新時(shí)間:2025-08-26

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問(wèn) 量 :1055

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產(chǎn)品介紹

幾丁質(zhì)酶活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
微量法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書(shū)操作。
貨號(hào):BC0825
規(guī)格:100T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱規(guī)格保存條件
提取液液體60 mL×1瓶2-8℃保存
試劑一液體8mL×1瓶2-8℃保存
試劑二液體9 mL×1瓶2-8℃保存
試劑三液體3mL×1瓶2-8℃保存
試劑四A粉劑×22-8℃保存
試劑四B液體50mL×1瓶2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品粉劑×12-8℃保存
溶液的配制:
  1. 試劑二:此試劑為懸濁液,使用前需搖勻;

  2. 試劑三:此試劑為飽和溶液,低溫(2-8℃)條件取出會(huì)有晶體析出,60℃加熱使其溶解即可;

  3. 試劑四:臨用前取一瓶試劑四A,加入21mL試劑四B中,充分溶解,現(xiàn)用現(xiàn)配。用不完的試劑2-8℃可以保存4(試劑四B若有結(jié)晶可37℃促進(jìn)溶解)

  4. 標(biāo)準(zhǔn)品:5mg N-乙酰氨基葡萄糖。臨用前加入 1mL 試劑一配制成 5mg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液,即5000μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液,2-8℃可以保存4 周。

產(chǎn)品說(shuō)明:
幾丁質(zhì)酶主要存在于蝦、蟹、昆蟲(chóng)等甲殼類動(dòng)物的外殼與軟體動(dòng)物的器官(例如烏賊的軟骨),以及真菌類的細(xì)胞壁中。而幾丁質(zhì)酶(EC 3.2.1.14)可催化幾丁質(zhì)水解,具有抵御真菌侵染的作用,成為抗真菌病害的研究熱點(diǎn)。
幾丁質(zhì)酶水解幾丁質(zhì)產(chǎn)生N-乙酰氨基葡萄糖,N-乙酰氨基葡萄糖與堿共熱產(chǎn)生的中間化合物可進(jìn)一步與對(duì)二甲氨 基 苯甲醛反應(yīng)產(chǎn)生顯色物質(zhì),該顯色物質(zhì)在585nm處有特征吸收峰,吸光值增加速率反映了幾丁質(zhì)酶的活性。



注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、低溫離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液槍、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。


操作步驟:具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件

注意事項(xiàng):
  1. 反應(yīng)結(jié)束后盡快進(jìn)行比色。

  2. 吸光值大于1.5或者ΔA大于1時(shí),樣本用提取液適當(dāng)稀釋再測(cè)定或者縮短37℃酶促反應(yīng)時(shí)間,注意同步修改計(jì)算公式。若ΔA小于0.01時(shí),可以延長(zhǎng)第一步37℃反應(yīng)時(shí)間或者加大樣本的加入量,注意修改計(jì)算公式。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例:
  1. 取0.111g蝦殼加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨,取上清后按照測(cè)定步驟操作,96孔板測(cè)定吸光度并計(jì)算ΔA=A測(cè)定-A對(duì)照=0.531-0.054=0.477,帶入標(biāo)曲y=0.007x+0.0205,得出x=65.214μg/mL,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:

幾丁質(zhì)酶活性(U/g 質(zhì)量)=2.5×x÷W=1468.790U/g 質(zhì)量。
  1. 取0.113g平菇加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨,取上清后按照測(cè)定步驟操作,96孔板測(cè)定吸光度并計(jì)算ΔA=A測(cè)定-A對(duì)照=0.754-0.055=0.699,帶入標(biāo)曲y=0.007x+0.0205,得出x=96.929 μg/mL,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:

幾丁質(zhì)酶活性(U/g 質(zhì)量)=2.5×x÷W=2144.437 U/g 質(zhì)量。
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