酸性蛋白酶（ACP）活性檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC2285
規格：100T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前加入4 mL試劑五，沸水浴中攪拌溶解；

2. 標準品：20μmol/mL標準酪*酸。

產品說明：
ACP是一種在酸性環境下催化蛋白質水解的酶。該酶主要用于酒精發酵、啤酒釀造、毛皮軟化、果酒澄清、醬油釀造、飼料等。
    酸性條件下，ACP催化酪蛋白水解產生酪*酸；在堿性條件下，酪*酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍；鎢藍在680nm有特征吸收峰，通過測定其吸光度增加，來計算ACP活性。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
研缽/勻漿器、臺式離心機、水浴鍋、磁力攪拌器、可調式移液槍、可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、1.5 mL EP管、冰、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
注意事項：
若反應較弱，（A測定-A對照）差值較小，可適當延長反應時間（20-30min），即第一步水浴時間，最后計算酶活時對公式進行修改。
實驗實例：

1. 取0.1g小鼠肝臟加入1mL提取液冰上充分研磨，10000rpm 4℃離心10min，取上清，置冰上，之后按照測定步驟操作，使用96孔板測得計算A測定=0.303，A對照=0.271，A標準=0.253，A空白=0.044，按樣本質量計算酶活得：ACP活性（U/g 質量）=0.125×（A測定-A對照）÷（A標準-A空白）÷W=0.191 U/g 質量。

相關發表文獻：

1. Xin-Bin, Gu, Xin, et al. Hematopoietic Substrate-1-Associated Protein X-1 Regulates the Proliferation and Apoptosis of Endothelial Progenitor Cells Through Akt Pathway Modulation[J]. Stem Cells, 2017. (IF 5.614)

2. Shijun Wang, Yunfei Cao, Zuqing Yang, et al. MicroRNA-93-5p increases multidrug resistance in human colorectal carcinoma cells by downregulating cyclin dependent kinase inhibitor 1A gene expression. Oncology Letters. December 2016. (IF 1.874)

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