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當前位置:首頁產品中心生化檢測試劑盒-常量法淀粉系列BC4270-50T/48S支鏈淀粉含量檢測試劑盒

支鏈淀粉含量檢測試劑盒
產品簡介:

儲存條件
2-8℃
中文名稱
支鏈淀粉含量檢測試劑盒
有效期
6個月
單位

英文名稱
Amylopectin Content Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規格
50T/48S
自備試劑
該試劑盒實驗過程中需自備試劑,詳情見網站說明書

產品型號:BC4270-50T/48S

更新時間:2024-04-15

廠商性質:生產廠家

訪 問 量 :1729

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產品介紹

支鏈淀粉含量檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意:本產品試劑有所變動,請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號:BC4270
規格:50T/48S
產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
試劑名稱規格保存條件
試劑一液體60 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二液體50 mL×1瓶(自備)2-8℃保存
試劑三液體30 mL×1瓶2-8℃保存
試劑四-2-8℃保存
試劑五液體6 mL×12-8℃保存
試劑六液體10mL×1瓶2-8℃保存
標準品粉劑×12-8℃保存
溶液的配制:
  1. 試劑二:*50 mL自備。

  2. 試劑四:提供125 mL空瓶一個;將試劑三:H2O =9 mL:91 mL混勻,現用現配,2-8保存半年。

  3. 標準品:10 mg支鏈淀粉。臨用前加入0.1 mL無水乙醇和0.9 mL試劑三,混勻后封口膜封口,沸水浴至溶解,即10 mg/mL的支鏈淀粉,2-8℃保存半年。

產品說明:
支鏈淀粉又稱膠淀粉,一般由幾千個葡萄糖殘基組成,淀粉中直鏈淀粉和支鏈淀粉的比例和含量對淀粉產品的加工、物化特性、糊化溫度等有著直接的影響。
支鏈淀粉和碘形成紅紫色絡合物,利用乙醇分開樣本中的可溶性糖和淀粉,再用碘與其反應得到支鏈淀粉含量。

技術指標:
低檢出限:0.0044 mg/mL
線性范圍:0.0125-0.5 mg/mL
注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、天平、臺式離心機、1mL玻璃比色皿、可調式移液槍、研缽/勻漿器、*、無水乙醇、EP管。
操作步驟:
一、樣本處理(可適當調整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
 
  1. 稱取0.005g烘干樣本加入1mL試劑一,充分勻漿

  2. 80℃水浴提取30min3000g25℃離心5min,棄上清,留沉淀

  3. 在步驟2沉淀中加入1mL試劑二(*)振蕩 5min3000g,25℃離心5min,棄上清,留沉淀

  4. 在步驟3沉淀中加入5mL試劑四充分溶解,90℃水浴10min,冷卻后3000g25℃離心5min,取上清待測。

二、測定步驟
  1. 分光光度計預熱30min以上,調節雙波長至530nm755nm,蒸餾水調零。

  2. 標準液的稀釋:10 mg/mL的標準溶液用試劑四稀釋至0.5、0.40.20.10.050.0250.0125 mg/mL標準溶液待測。

  3. 標準液稀釋可參考下表

序號稀釋前濃度(mg/mL)標準液體積(µL)試劑四體積(µL)稀釋后濃度(mg/mL)
11010019000.5
20.58002000.4
30.45005000.2
40.25005000.1
50.15005000.05
60.055005000.025
70.0255005000.0125
備注:實驗中每個標準管需200µL標準溶液。
  1. 操作表:(在1.5mL離心管中依次加入下列試劑)

試劑名稱測定管標準管空白管
樣本(µL)200--
標準溶液(μL-200-
蒸餾水(µL)--200
試劑五(µL)757575
試劑六(µL)505050
蒸餾水(µL)675675675
充分混勻,測定530nm和755nm處的吸光值,530nm下的測定管、標準管、空白管分別記為A測定、A標準和A空白,755nm下的分別記為A’測定、A’標準、A’空白,計算ΔA測定=A測定-A空白)-A’測定-A’空白),ΔA標準=A標準-A空白)-A’標準-A’空白)。標準曲線和空白管只需測定1-2次
三、支鏈淀粉含量計算
  1. 標準曲線的建立

以支鏈淀粉標準溶液濃度為x軸xmg/mL,標準溶液對應的ΔA標準為y軸yΔA標準,建立標準曲線,得到標準方程y=kx+b,將ΔA測定帶入方程得到xmg/mL)。
  1. 支鏈淀粉含量(mg/g 質量)=x×V樣總÷W=5x÷W

V樣總:加入試劑四體積,5mLW:樣本質量,g
注意事項:
  1. 反應后建議在20min內檢測完成防止褪色。

  2. 如果測定吸光值超過線性范圍吸光值,可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進行測定。注意同步修改計算公式。

實驗實例:
  1. 取0.01g紅豆于研缽中研碎,加入1mL試劑一,進行樣本處理取上清3倍稀釋后按照測定步驟操作,測得計算ΔA測定=A測定-A空白)-A’測定-A’空白)=0.370-0.045-0.233-0.015=0.107,帶入標準曲線y=0.7564x-0.0006計算x=0.1423,按樣本質量計算含量得:

支鏈淀粉含量(mg/g 質量)=5x÷W×3(稀釋倍數)=213.45 mg/g 質量。
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支鏈淀粉含量檢測試劑盒

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