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總果膠含量檢測(cè)試劑盒 抗氧化
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

儲(chǔ)存條件
2-8℃
中文名稱
總果膠含量檢測(cè)試劑盒 抗氧化
有效期
6個(gè)月
單位

英文名稱
Pectin Content Assay Kit
檢測(cè)方法
可見(jiàn)分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/24S
自備試劑
該試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需自備試劑,詳情見(jiàn)網(wǎng)站說(shuō)明書(shū)

產(chǎn)品型號(hào):BC1400-50T/24S

更新時(shí)間:2024-04-15

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問(wèn) 量 :940

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總果膠含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào):BC1400
規(guī)格:50T/24S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱規(guī)格保存條件
提取液一液體110 mL×1瓶2-8℃保存
提取液二液體70 mL×1瓶2-8℃保存
試劑一液體60 mL×1瓶自備2-8℃保存
試劑二液體3 mL×1瓶2-8℃保存
試劑三液體5 mL×1瓶2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品粉劑×12-8℃保存
溶液的配制:
  1. 試劑一:自備濃硫酸。

  2. 標(biāo)準(zhǔn)品:10 mg半乳糖醛酸,臨用前加入0.943 mL提取液二,配成50 μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)液。

產(chǎn)品說(shuō)明:
果膠是植物細(xì)胞壁主要組成成分之一,分為水溶性果膠和不溶性果膠(原果膠或堿溶性果膠)。果膠是一種天然高分子化合物,具有良好的膠凝化和乳化穩(wěn)定作用,已廣泛用于食品、醫(yī)藥、日化及紡織行業(yè)。
原果膠在稀酸中水解為可溶性果膠,與原有的可溶性果膠進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為半乳糖醛酸,產(chǎn)物在強(qiáng)酸中與 咔 唑縮合生成紫紅色化合物,在530nm處有特征吸收峰。
技術(shù)指標(biāo):
低檢出限:0.0237 μmol/mL
線性范圍:0.0625-1.5 μmol/mL
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、濃硫酸、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器和蒸餾水。
操作步驟
一、樣本處理可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn)
將組織樣本搗碎,按照樣本質(zhì)量(g)和提取液一體積(mL)1: 20的比列(建議取約0.05g樣本,加入1mL提取液一),置于90℃恒溫水浴鍋中浸提30min,取出冷卻后于5000g25℃離心10min,去掉上清,沉淀中再加入1mL提取液一重復(fù)操作一次,離心后去上清,沉淀中加入1mL提取液二,置于90℃恒溫水浴鍋中水解1h,取出冷卻后于8000g、25℃離心15min,取上清液待測(cè)。
二、測(cè)定步驟
 
  1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至530nm,蒸餾水調(diào)零。

  2. 標(biāo)準(zhǔn)品的制備:將50μmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)液用提取液二稀釋為1.51、0.50.250.1250.0625 μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。

  3. 操作表:

試劑名稱空白管標(biāo)準(zhǔn)管對(duì)照管測(cè)定管
樣本(μL--100100
標(biāo)準(zhǔn)品(μL-100--
蒸餾水(μL100---
試劑一(μL800800800800
混勻、90℃放置10min,取出后冷卻
試劑二(μL--100-
試劑三(μL100100-100
混勻,25℃靜置30min后測(cè)定530nm處吸光值,分別記為A空白管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A對(duì)照管和A測(cè)定管。ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管,ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管。
三、總果膠含量的計(jì)算
  1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:

以各個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為x軸,其對(duì)應(yīng)的ΔA標(biāo)準(zhǔn)為y軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到標(biāo)準(zhǔn)方程y=kx+b,將ΔA測(cè)定帶入方程得到xμmol/mL)。
  1. 總果膠含量的計(jì)算:

總果膠含量(μmol/g 質(zhì)量)=x×V提取液二÷W=x÷W
V提取液二:加入提取液二的體積,1mLW:樣本質(zhì)量,g
注意事項(xiàng):
  1. 濃硫酸具有強(qiáng)腐蝕性,操作時(shí)需特別注意,90℃加熱、冷卻后再打開(kāi)蓋子,以防液體飛濺燒傷。

  2. 如果測(cè)定吸光值超過(guò)線性范圍吸光值,可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測(cè)定

實(shí)驗(yàn)實(shí)例:
  1. 取0.05g蘋(píng)果果肉進(jìn)行樣本處理,取上清液5倍稀釋后按照測(cè)定步驟操作,測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定管=A測(cè)定管-A對(duì)照管=0.34-0.05=0.29,依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.7498x+0.017計(jì)算x=0.364,按樣本質(zhì)量計(jì)算:總果膠含量(μmol/g 質(zhì)量)= x×5(稀釋倍數(shù))÷W=36.4 μmol/g 質(zhì)量。

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總果膠含量檢測(cè)試劑盒 抗氧化 總果膠含量檢測(cè)試劑盒 抗氧化

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