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專注于生物學試劑及試劑盒領域
服務熱線：18101056239
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產品型號：BC1530-50T/24S
更新時間：2024-04-08
廠商性質：生產廠家
訪 問 量 ：1949
010-50973130
產品分類
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尿素氮（BUN）含量檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
貨號：BC1530
規格：50T/24S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規格 | 保存條件 |
試劑一 | 粉劑×2瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體15 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三A液 | 液體3 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三B液 | 2-8℃保存 | |
試劑四 | 液體15 mL×1瓶 | |
標準品 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
1、 試劑一：臨用前加5 mL蒸餾水充分溶解，現用現配，4℃可保存一周。
2、 試劑三：臨用前將A液倒入B液中混合，或者根據比例（A:B=1:4）現用現配。
3、 標準品：10 mg尿素。臨用前加入4.66 mL蒸餾水配制成1 mg/mL尿素氮標準液。
產品說明：
尿素（BUN）是人體蛋白質代謝的主要終末產物，BUN構成了血液中絕大部分的非蛋白質氮，血液尿素氮是腎功能的主要指標之一。用靛酚藍比色法測定脲酶水解尿素產生的NH3-N，生成的藍色靛酚和尿素氮的濃度成正比。
技術指標：
最檢出限：0.000086 μg/mL
線性范圍：0.390625-50 μg/mL
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、天平、研缽/勻漿器、低溫離心機、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。
操作步驟：
一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
組織：按照質量（g）：蒸餾水體積(mL)為 1：5-10的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL蒸餾水），冰上勻漿后于4℃，12000g離心15min，取上清待測。
細菌或細胞：按照細胞數量（104個）：蒸餾水體積（mL）為500-1000：1的比例（建議500萬個細胞加入1mL蒸餾水），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3s，間隔7s，總時間3min）；然后4℃，12000g離心15min，取上清置于冰上待測。
血清（漿）或其它液體：直接檢測。
二、測定步驟
1. 分光光度計預熱30min，波長調至630nm，蒸餾水調零。
2. 將1mg/mL尿素氮標準液用蒸餾水稀釋至25μg/mL備用。
3. 加樣表：
試劑名稱（μL） | 空白管 | 標準管 | 測定管 | 對照管 |
樣本 | - | - | 60 | 60 |
標準品 | - | 60 | - | -- |
蒸餾水 | 60 | - | - | 120 |
試劑一 | 120 | 120 | 120 | - |
試劑二 | 220 | 220 | 220 | 220 |
充分混勻，于37℃反應10min | ||||
試劑三 | 80 | 80 | 80 | 80 |
試劑四 | 60 | 60 | 60 | 60 |
混勻，37℃靜置30min | ||||
蒸餾水 | 460 | 460 | 460 | 460 |
充分混勻后測定630nm處吸光值，記為A空白管、A標準管、A測定管和A對照管。計算ΔA標準=A標準管-A空白管，ΔA測定=A測定管-A對照管。 | ||||
三、計算公式
1. 按樣本質量計算：
尿素氮含量（μg/g 質量）=ΔA測定÷ΔA標準×C標準品×V提取÷W=25×ΔA測定÷ΔA標準÷W
2. 按蛋白濃度計算：
尿素氮含量（μg/mg prot）=ΔA測定÷ΔA標準×C標準品×V提取÷（Cpr×V提取）=25×ΔA測定÷ΔA標準÷Cpr
3. 按細胞數計算：
尿素氮含量（μg/104 cell）=ΔA測定÷ΔA標準×C標準品×V提取÷細胞數量=25×ΔA測定÷ΔA標準÷細胞數量
4. 按液體體積計算：
尿素氮含量（μg/mL）=ΔA測定÷ΔA標準×C標準品=25×ΔA測定÷ΔA標準
C標準品：標準品濃度，25μg/mL；V提取：提取液體積，1mL；W：樣本質量，g；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；細胞數量：以萬計。
注意事項：
如果樣本吸光值大于1.3，建議將樣本用蒸餾水稀釋后進行測定。
相關發表文獻：
[1] Xiaoguang Zhu,Jun Shi,Huicong li,et al. PVT1 knockdown alleviates vancomycin-induced acute kidney injury by targeting miR-124 via inactivation of NF-κB signaling. RSC advances. September 2018;(IF3.049)
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