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專注于生物學試劑及試劑盒領域
服務熱線：18101056239
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產品型號：BC0040-50T/48S
更新時間：2024-04-03
廠商性質：生產廠家
訪 問 量 ：1686
010-50973130
產品分類
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土壤硝態氮含量檢測試劑盒
可見分光光度法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC0040
規格：50T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
溶液的配制：
1、 試劑一：臨用前取1瓶加入2 mL濃硫酸充分溶解。配制好后盡快使用，2-8℃可保存一周。
2、 標準品：10 mg硝酸鉀。臨用前加入1.386 mL蒸餾水溶解，配成1000 μg/mL的NO3--N標準液，2-8℃保存兩周。
產品說明：
硝態氮是指硝酸鹽中所含有的氮元素，土壤中硝態氮是高等植物吸收氮的主要形式之一，其含量直接關系到作物的產量與品質。在濃酸條件下，NO3-與水楊酸反應生成硝基水楊酸，在堿性條件下（pH>12）呈黃色，其顏色深淺與含量成正比，即可計算得硝態氮含量。
技術指標：
*檢出限：0.0495 μg/mL
線性范圍：0.1953125-80 μg/mL
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、1mL玻璃比色皿、可調式移液槍、振蕩器、濃硫酸、蒸餾水。
操作步驟：
一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
按照土壤質量（g）：蒸餾水體積（mL）為 1：5~10的比例（建議稱取約0.1g土樣，加入1mL蒸餾水）加入蒸餾水，置于震蕩儀中振蕩提取1h，10000g，25℃離心10min，取上清待測。（土樣要求參考注意事項1.2.3.）。
二、測定步驟
1、 分光光度計預熱30min以上，調節波長至410nm，蒸餾水調零。
2、 標準溶液的稀釋：取25μL 1000μg/mL NO3--N標準液，加入975μL蒸餾水，充分混勻，配制成25μg/mL標準液使用，現用現配。（實驗中每管需要40μL，為減小實驗誤差，故配制大體積）。
3、 操作表：
試劑名稱（μL） | 測定管 | 標準管 | 空白管 |
樣本 | 40 | - | - |
標準溶液 | - | 40 | - |
蒸餾水 | - | - | 40 |
試劑一 | 60 | 60 | 60 |
充分混勻，置于25℃水浴鍋反應30min | |||
試劑二 | 1400 | 1400 | 1400 |
渦旋振蕩，使出現的沉淀充分溶解，取1mL反應液于1mL玻璃比色皿中測定410nm處吸光值A，記為A測定管，A標準管，A空白管。計算ΔA測定=A測定管-A空白管，ΔA標準=A標準管-A空白管。標準管與空白管只需測1-2次。 | |||
三、NO3--N含量的計算
NO3--N含量（μg/g 土樣）=ΔA測定÷ΔA標準×C標準×V提取÷W=25×ΔA測定÷ΔA標準÷W
W：樣本質量，g；C標準：標準溶液濃度，25μg/mL；V提取：提取液體積，1mL。
注意事項：
1、 土壤膠體不吸附硝酸根離子，且其易溶于水，在土壤內部移動，所以測定多個樣本或者重復樣本室注意保持相同的采樣深度。
2、 土壤經風干或者烘干很容易引起硝態氮含量的變化，所以建議采用新鮮土壤進行測定。樣品采集后應于4℃ 下密封運輸和保存，并在3d內分析完畢。否則，應于-20℃（深度冷凍）下以小塊、小份保存，樣品中硝酸鹽氮可以保存數周。當測定深度冷凍的硝酸鹽氮含量時，應控制解凍的溫度和時間。室溫環境下解凍時，需在4 h內完成樣品解凍、勻質化和提取；如果在4℃下解凍，解凍時間不應超過48 h。
3、 如果要比較不同樣本間的硝態氮含量，需將土樣烘干后按干重計算后再進行比較。
4、 試劑一和試劑二均具有強腐蝕性，操作時需做好防護措施。
5、 如果吸光值大于1.5，建議將樣本用蒸餾水稀釋后再進行測定。
參考文獻：
[1] Vendrell P F, Zupancic J. Determination of soil nitrate by transnitration of salicylic acid[J]. Communications in Soil Science and Plant Analysis, 1990, 21(13-16): 1705-1713.
[2] Cataldo D A, Maroon M, Schrader L E, et al. Rapid colorimetric determination of nitrate in plant tissue by nitration of salicylic acid[J]. Communications in soil science and plant analysis, 1975, 6(1): 71-80.
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