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當(dāng)前位置:首頁(yè)產(chǎn)品中心生化檢測(cè)試劑盒-常量法氨基酸代謝系列BC0180-50T/48S半*氨酸(Cys)含量測(cè)試盒 氨基酸代謝

半*氨酸(Cys)含量測(cè)試盒 氨基酸代謝
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

儲(chǔ)存條件
2-8℃
中文名稱
半*氨酸(Cys)含量測(cè)試盒 氨基酸代謝
有效期
6個(gè)月
單位

英文名稱
Cysteine(Cys) Content Assay Kit
檢測(cè)方法
可見(jiàn)分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S
自備試劑
該試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需自備試劑,詳情見(jiàn)網(wǎng)站說(shuō)明書(shū)

產(chǎn)品型號(hào):BC0180-50T/48S

更新時(shí)間:2024-04-24

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問(wèn) 量 :2060

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半*氨酸(Cys)含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) 詳見(jiàn)附件
可見(jiàn)分光光度法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書(shū)操作。
貨號(hào):BC0180
規(guī)格:50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱規(guī)格保存條件
提取液液體25 mL×1瓶2-8℃保存
試劑一液體45 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二粉劑×22-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品粉劑×12-8℃保存
溶液的配制:
  1. 試劑二:用前一天,向試劑二中加5 mL蒸餾水充分溶解,再加磷酸1.25 mL,混勻后蓋緊(防止水分散失)沸水浴2h;冷卻后加20 mL蒸餾水,4℃可保存2周。(一瓶即可做50T,為延長(zhǎng)試劑盒使用時(shí)間,故多給一瓶)

  2. 標(biāo)準(zhǔn)品:10 mg半*氨酸。將標(biāo)準(zhǔn)品加入4.13mL蒸餾水得到20μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)液。4℃可以保存4周。

產(chǎn)品說(shuō)明:
蛋白質(zhì)含有三種含硫氨基酸:甲*氨酸*氨酸和半*氨酸(Cys)。其中,Cys是一種含有巰基的含硫氨基酸,從甲*氨酸轉(zhuǎn)化而來(lái),并且可與*氨酸互相轉(zhuǎn)化。Cys參與蛋白質(zhì)二硫鍵的形成,經(jīng)常是蛋白質(zhì)活性中心的組成部分,還可以為其它生理生化反應(yīng)提供巰基。此外,Cys大量積聚在皮膚和粘膜表面,在角蛋白生成中維持重要的巰基酶的活性,并且補(bǔ)充巰基,以維持皮膚的正常代謝,調(diào)節(jié)表皮最下層的色素細(xì)胞生成的底層黑色素。具有美白、解毒、改善炎癥和過(guò)敏性皮膚等作用。
Cys還原磷鎢酸生成鎢藍(lán),在600nm處有吸收峰;通過(guò)測(cè)定600nm吸光度,計(jì)算Cys含量。
技術(shù)指標(biāo):
檢出限:0.0053 μmol/mL
線性范圍:0.03125-3 μmol/mL
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、磷酸和蒸餾水。

一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))
  1. 液體樣本中半*氨酸提取:

取0.2mL液體樣本,加提取液0.3mL,充分混勻,11000rpm 4℃離心10min,取上清液待測(cè)。
  1. 組織中半*氨酸提取:


稱取約0.2g組織,加入0.5mL提取液,冰上充分研磨,11000rpm 4℃離心10min,取上清液待測(cè)。
二、測(cè)定步驟
  1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到600nm,蒸餾水調(diào)零。

  2. 標(biāo)準(zhǔn)液的配制:用蒸餾水將20μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)液稀釋為210.50.250.1250.0625 μmol/mL濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

  3. 按下表加入各試劑

試劑名稱(μL測(cè)定管標(biāo)準(zhǔn)管空白管
樣本200--
標(biāo)準(zhǔn)品-200-
蒸餾水--200
試劑一500500500
試劑二300300300
混勻后室溫靜置15min,于600nm處測(cè)定吸光值。
三、半*氨酸含量計(jì)算
  1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:

以各標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為x軸,以?AA標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)為y軸做標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到方程y=kx+b。將(A測(cè)定管-A空白管)帶入方程求x值。
  1. 半*氨酸含量計(jì)算:

(1)按液體樣本的體積計(jì)算
半*氨酸含量(μmol/mL=x×V樣總÷V=2.5x
(2)按樣本質(zhì)量計(jì)算
半*氨酸含量(μmol/g 質(zhì)量)=x×V樣總÷W=0.5x÷W
V:液體樣本體積,0.2mLV樣總:提取體系體積,0.5mLW:樣本質(zhì)量,g
注意事項(xiàng):
如果測(cè)定吸光值超過(guò)線性范圍吸光值,可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測(cè)定
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn):
  1. Huang Q, Wang M, Xia Z. The SULTR gene family in maize (Zea mays L.): gene cloning and expression analyses under sulfate starvation and abiotic stress[J]. Journal of plant physiology, 2018, 220: 24-33.

  2. Yansha Han,Mengyang Wu,Lihong Hao,et al. Sulfur dioxide derivatives alleviate cadmium toxicity by enhancing antioxidant defence and reducing Cd2+ uptake and translocation in foxtail millet seedlings. Ecotoxicology and Environmental Safety. August 2018;(IF4.527)

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