儲存條件
-20℃
中文名稱
磷酸果糖激酶（PFK）測試盒糖代謝
有效期
6個月
單位
盒
英文名稱
Phosphofructokinase(PFK) Activity Assay Kit
檢測方法
紫外分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S

產(chǎn)品型號：BC0530-50T/48S

更新時間：2024-04-24

廠商性質：生產(chǎn)廠家

訪問量：1842

服務熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測試劑盒-常量法

谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）活性檢測總谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測 α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測硫代葡萄糖苷含量檢測生物堿含量檢測總氧化狀態(tài)（TOS）檢測 α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測水溶性物質羥自由基清除能力檢測植物銨態(tài)氮含量檢測試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測試劑盒細胞酸性磷酸酶細胞堿性磷酸酶果膠系列轉氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測定系列其它系列信號系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環(huán)系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

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產(chǎn)品介紹

磷酸果糖激酶（PFK）活性檢測試劑盒說明書
紫外分光光度法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC0530
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
提取液	液體60 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	液體45 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二A	粉劑×1支	-20℃保存
試劑二B	粉劑×1支	-20℃保存
試劑二C	粉劑×2支	-20℃保存
試劑二D	粉劑×1支	-20℃保存
試劑三	液體45μL×1支	2-8℃保存
試劑四	液體20μL×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

試劑二A：臨用前加入1mL蒸餾水，用不完的試劑-20℃分裝保存4周，避免反復凍融；
試劑二B：臨用前加入1mL蒸餾水，用不完的試劑-20℃分裝保存4周，避免反復凍融；
試劑二C：臨用前取一支加入0.25mL蒸餾水，用不完的試劑-20℃分裝保存2周，避免反復凍融；
試劑二D：臨用前加入1mL蒸餾水，用不完的試劑-20℃分裝保存4周，避免反復凍融；
試劑三：臨用前根據(jù)用量按照試劑三:蒸餾水為2μL:13μL（約3T）的體積比例充分混勻，現(xiàn)用現(xiàn)配；
試劑四：臨用前根據(jù)用量按照試劑四:蒸餾水為4μL:65μL（約13T）的體積比例充分混勻，現(xiàn)用現(xiàn)配；
工作液的配制：根據(jù)樣本量按試劑一：試劑二A：試劑二B：試劑二C：試劑二D =22mL：0.5mL：0.5mL：0.25mL：0.5mL（約29T）的比例配制工作液，現(xiàn)用現(xiàn)配；

產(chǎn)品說明：
磷酸果糖激酶（Phosphofructokinase，PFK，EC 2.7.1.11）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，負責將果糖-6-磷酸和ATP轉化為果糖-1,6二磷酸和ADP，是糖酵解過程的關鍵調節(jié)酶之一。
PFK催化果糖-6-磷酸和ATP生成果糖-1,6-二磷酸和ADP，*酸激酶和乳酸脫氫酶進一步依次催化NADH氧化生成NAD⁺，在340nm下測定NADH下降速率，即可反映PFK活性。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、臺式離心機、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽/勻漿器/細胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。
“具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件"
注意事項：

測定過程中試劑三、試劑四和樣本在冰上放置，以免變性和失活。
比色皿中反應液的溫度必須保持37℃，取小燒杯一只裝入一定量的37℃蒸餾水，將此燒杯放入37℃水浴鍋中。在反應過程中把比色皿連同反應液放在此燒杯中。
最好兩個人同時做此實驗，一個人比色，一個人計時，以保證實驗結果的準確性。
若ΔA大于0.5，需將酶液用酶提取液稀釋，使ΔA小于0.5，可提高檢測靈敏度。注意同步修改計算公式。

實驗實例：

取0.1g黑麥草加入1mL提取液進行勻漿研磨，取上清之后按照測定步驟操作，測得計算ΔA= A1-A2 = 1.375-0.995=0.380，按樣本質量計算酶活得：

PFK活性（U/g 質量）=450×ΔA ÷W=450×0.380 ÷0.1=1710 U/g 質量。

取0.1g桃葉加入1mL提取液進行勻漿研磨，取上清之后按照測定步驟操作，測得計算ΔA= A1-A2 = 1.38-1.323=0.057，按樣本質量計算酶活得：

PFK活性（U/g 質量）=450×ΔA ÷W=450×0.057 ÷0.1=256.5 U/g 質量。
參考文獻：

Papagianni M, Avramidis N. Lactococcus lactis as a cell factory: a twofold increase in phosphofructokinase activity results in a proportional increase in specific rates of glucose uptake and lactate formation[J]. Enzyme and microbial technology, 2011, 49(2): 197-202.

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