細胞培養試劑 EDTA脫鈣液 （PH7.2）

貨號 ：E1171
規格 ：100ml/500ml
保存 ：常溫保存，有效期 1 年。

產品簡介 ：
    一些組織內含有骨質或鈣化灶時，含鈣的組織不宜直接用石蠟包埋切片。這是因為鈣和石蠟之間的密度不同，較難切除完整的切片。對含鈣組織好固定之后，再進行脫鈣或二者同時進行。然后進行下游的實驗，如脫水、透明、浸蠟、包埋、切片。用于脫鈣的試劑很多，脫鈣劑包括有機酸、無機酸、乙二胺四乙酸（EDTA）以及電解法脫鈣。
    EDTA 是一種相對較好的螯合脫鈣劑，對組織結構影響小，可以較好的保存組織的某些酶類， 經 EDTA脫鈣后的組織可以進行免疫組化和原位雜交染色。但是該法脫鈣速度太慢，一般脫需要數周數月。
    Solarbio EDTA 脫鈣液優點：①經 EDTA 脫鈣的組織染色結果好；②對組織的結構損害小；③用化學方法測試可以確定脫鈣的終點。
    Solarbio EDTA 脫鈣液缺點：①脫鈣速度很慢，不適合常規標本脫鈣使用；②脫鈣后組織會稍微變硬。

操作步驟 ：

1，骨組織脫鈣時，取材不易過厚，一般大約 5mm。
2，組織固定后，用 PBS 清洗 3 次，每次 20min。
3，組織用蒸餾水洗清洗 3 次，每次 20min。
4，組織轉移 20～30 倍體積的 EDTA 脫鈣液中，脫鈣 10～30 天或更長時間。如果想加快脫鈣速度，可以置于 37℃進行脫鈣。如果必要，更換新的 EDTA 脫鈣液繼續脫鈣，多數組織脫鈣 2 周～3 個月即可，每周更換一次，直終點。亦可采用微波快速脫鈣法：微波爐設在 200W 左右的檔位，每次加熱 5min，依據組織厚度和密度重復 3～5min，中間間隔 3～5min。
5，用蒸餾水沖洗數次。
6，常規脫水、包埋。

注意事項 ：

1，厚度 5mm 的骨組織塊脫鈣時間一般脫鈣 10~30 天即可。
2，適當加溫能加快脫鈣的速度，一般不應超過 37～40℃，溫度過高容易使骨組織造成松散解體，尤其不可大于 60℃。
3，脫鈣應*，防止脫鈣不足或過度。脫鈣程度應控制在不影響組織切片的同時盡量縮短脫鈣時間，以免脫鈣過長引起組織損害。
4，脫鈣用具避免使用金屬容器，盡量使用玻璃容器。
5，骨組織脫鈣應先固定后脫鈣或脫鈣固定同時進行，不應先脫鈣后固定，以便減少組織的損傷程度。
6，每隔一段時間檢測一次脫鈣程度，避免脫鈣過度，脫鈣過度會增加組織的損傷程度，影響染色結果。
7，為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
附錄 ：
脫鈣終點的測定（物理法）：采用針刺、手掐、鉗夾等方法，當骨組織變軟或針刺時沒有阻力感即可終止
脫鈣。物理檢測法會對組織結構有一定的損害， 盡量避免用力過大或反復檢測。

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