血紅蛋白（Hb）含量檢測試劑盒說明書

微量法

貨號：BC5585

規格：100T/96S

產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 標準品：臨用前加入1mL蒸餾水充分溶解，即為10mg/mL血紅蛋白標準品，2-8℃可保存4周。

2. 0.625mg/mL標準品配制：取50μL10mg/mL血紅蛋白標準品，加入750μL蒸餾水，充分混勻，配制成0.625mg/mL的血紅蛋白標準品使用，現配現用。

產品說明：

血紅蛋白（Hemoglobin，Hb）是一種含有血紅素的輔助因子蛋白，在輸送和儲存氧氣方面有重要作用。血紅蛋白分子由四個多肽鏈蛋白組成，兩條α鏈和兩條β鏈，每條鏈有一個包含一個鐵原子的環狀血紅素，氧氣結合在鐵原子上，被血液運輸。

使用改進的羥堿法測定血紅蛋白含量，血紅蛋白與工作液生成有色物質，在400nm處有特征吸收峰，顏色深淺在一定范圍內與血紅蛋白含量成正比。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計/酶標儀、低溫離心機、微量玻璃比色皿/96孔板、可調式移液槍、冰和蒸餾水。

操作步驟：

一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）

全血/溶血液/血漿/血清：直接測定。血清、血漿若有渾濁請離心后取上清置于冰上待測。

二、測定步驟

1、 可見分光光度計/酶標儀預熱30min以上，調節波長至400nm，分光光度計用蒸餾水調零。

2、 操作表：（在1.5mLEP管中依次加入以下試劑）

三、血紅蛋白（Hb）含量的計算

血紅蛋白含量（mg/mL）=ΔA測定÷（ΔA標準÷C標準）×F=0.625×ΔA測定÷ΔA標準×F

C標準：標準品的濃度，0.625 mg/mL；F：稀釋倍數。

注意事項：

1. 如果樣本測定吸光值大于1.5，建議將樣本用蒸餾水稀釋后進行測定。

2. 如果樣本測定吸光值小于0.01或接近空白管吸光值，可適當增大樣本量，空白管和標準管也需要進行相應調整。

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