中性轉化酶（NI）活性檢測試劑盒蔗糖

產品簡介：

中性轉化酶（NI）活性檢測試劑盒蔗糖
儲存條件
2-8℃
中文名稱
中性轉化酶(NI)活性檢測試劑盒
有效期
6個月
單位
盒
英文名稱
Neutral Invertase(NI) Activity Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規格
50T/24S

產品型號：BC0570-50T/24S

更新時間：2024-07-09

廠商性質：生產廠家

訪問量：1691

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產品介紹

中性轉化酶（NI）活性檢
測試劑盒說明書
可見分光光度法
貨號：BC0570
規格：50T/24S
產品內容：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規格	保存條件
提取液	液體50mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	液體60 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	粉劑×1瓶	2-8℃保存
試劑三	液體35 mL×1瓶	2-8℃保存
標準品	粉劑×1瓶	2-8℃保存

溶液的配制：

試劑二：臨用前加入30mL試劑一充分溶解備用；用不完的試劑4℃保存；
標準品：10mg葡萄糖，臨用前加入1mL蒸餾水溶解，制備10mg/mL葡萄糖標準液備用。

產品說明：
蔗糖轉化酶（Invertase，Ivr）催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖，是高等植物蔗糖代謝關鍵酶之一。根據最適 pH，將高等植物Ivr分為酸性轉化酶（AI）和中性轉化酶（NI）兩種類型。NI主要存在于細胞質中，負責分解細胞質中蔗糖為果糖和葡萄糖。
NI催化蔗糖分解產生還原糖，進一步與3,5－二硝基水楊酸反應，生成棕紅色氨基化合物，在540nm有特征光吸收，在一定范圍內540nm光吸收值與還原糖生成量成正比。通過光吸收增加速率來計算NI活性。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、冰、蒸餾水。

操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件

注意事項：
1、如果加入試劑三，煮沸10min后有混濁物出現，建議離心除去沉淀后，取上清測定吸光度。
2、如果吸光值大于1，可以用蒸餾水將樣本稀釋后測定（計算公式中乘以相應稀釋倍數）。
3、由于提取液中含有一定濃度的蛋白（約1mg/mL），所以在測定樣本蛋白濃度時需要減去提取液本身的蛋白含量。
實驗實例：

取0.1g冬青加入1mL提取液進行勻漿研磨，取上清后按照步驟操作，測得計算A測定=0.778，A對照=0.774，ΔA=A測定-A對照=0.778-0.774=0.004，帶入標準曲線y = 0.9582x - 0.123，計算x=（0.004+0.123）/0.9582=0.13254，按樣本質量計算酶活得： NI活性（U/g 質量）=33.3 ×x÷W =33.3 ×0.13254÷0.1=44.136 U/g 質量。

參考文獻：

Huang Y W, Nie Y X, Wan Y Y, et al. Exogenous glucose regulates activities of antioxidant enzyme, soluble acid invertase and neutral invertase and alleviates dehydration stress of cucumber seedlings[J]. Scientia horticulturae, 2013, 162: 20-30.

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