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專注于生物學試劑及試劑盒領域
服務熱線：18101056239
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產品型號：BC2965-100T/96S
更新時間：2024-07-09
廠商性質：生產廠家
訪 問 量 ：1208
010-50973130
產品分類
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中性、堿性土壤速效磷含量檢測試劑盒說明書
微量法
貨號：BC2965
規(guī)格：100T/96S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
| 試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
| 提取液 | 液體125 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑一 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑二 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑三 | 液體5 mL×1瓶 | 室溫保存 |
| 標準品 | 液體1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
試劑一：臨用前加入5 mL蒸餾水，溶解后2-8℃保存一周；
試劑二：臨用前加入5 mL蒸餾水，溶解后2-8℃保存一周；
標準品：10 μmol/mL標準磷儲備液；
工作液（定磷劑）的配制：按H2O：試劑一：試劑二：試劑三=2:1:1:1的比例配制，配好的工作液應為淺黃色。若變色則試劑失效，若是藍色則為磷污染，工作液應現配現用。
注意：配試劑最好用新的燒杯、玻璃棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。
產品說明：
速效磷是土壤中可被植物吸收的磷組分，包括全部水溶性磷、部分吸附態(tài)磷、一部分微溶性的無機磷和易礦化的有機磷等，土壤中速效磷是限制植物生長主要因子之一。
用弱堿法提取堿溶性磷和吸附態(tài)磷，鉬藍與磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物質，通過測定660nm光吸收，即可計算磷含量。
技術指標：
低檢出限：0.018 μmol/mL
線性范圍：0.03125-3 μmol/mL
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
實驗中所需儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、天平、臺式離心機、微量玻璃比色皿/96孔板、可調式移液槍、30-50目篩、漩渦震蕩儀、研缽、EP管、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
新鮮土樣風干，過30-50目篩，按照土壤質量（g）：提取液體積(mL)為1：10-20的比例（建議稱取約0.05g土樣，加入1mL提取液），振蕩提取1h，10000g，25℃離心10min，取上清液待測。
二、測定步驟
分光光度計/酶標儀預熱30min以上，調節(jié)波長至660nm，蒸餾水調零。
將10μmol/mL標準液用提取液稀釋為3、2、1、0.5、0.25、0.125μmol/mL的標準溶液備用。
標準溶液稀釋表：
樣本測定：(在1.5mL離心管中或96孔板依次加入下列試劑)
| 序號 | 稀釋前濃度（μmol/mL） | 標準液體積（µL） | 提取液體積（µL） | 稀釋后濃度（μmol/mL） |
| 1 | 10 | 150 | 350 | 3 |
| 2 | 10 | 100 | 400 | 2 |
| 3 | 2 | 250 | 250 | 1 |
| 4 | 1 | 250 | 250 | 0.5 |
| 5 | 0.5 | 250 | 250 | 0.25 |
| 6 | 0.25 | 250 | 250 | 0.125 |
| 7 | 0.125 | 250 | 250 | 0.0625 |
| 測定管 | 標準管 | 空白管 | |
| 樣本（µL） | 20 | - | - |
| 標準溶液（µL） | - | 20 | - |
| 提取液（µL） | 40 | 40 | 60 |
| 工作液（µL） | 80 | 80 | 80 |
| H2O（µL） | 60 | 60 | 60 |
| 充分混勻，25℃靜置30min，將液體置于微量玻璃比色皿/96孔板中，測定660nm處吸光值A，分別記為A測定管、A標準管和A空白管，ΔA=A測定管-A空白管，ΔA標準=A標準管-A空白管。（空白管和標準曲線只需測1-2次） | |||
注意事項：
1、工作液（定磷劑）應現配現用，正常顏色為淺黃色，如有變色或變藍則均為失效。
2、此法具有微量、靈敏、快速的特點。所以對測定所用試管或EP管等試驗器材均要求嚴格無磷。
3、顯色結束后應立即檢測。
4、如果測定吸光值超過線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進行測定。
5、用96孔板檢測時，注意板孔中的液體有無氣泡，如有氣泡應排除氣泡后再測定OD值。
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