土壤系列土壤多酚氧化酶（PPO）測試盒
貨號：BC0110
規格：50管/48樣
測試方法：微量法
S-PPO主要來源于土壤微生物、植物根系分泌物及動植物殘體分解釋放，催化土壤中芳香族化合物氧化成醌，醌與土壤中蛋白質、氨基酸、糖類、礦物等物質反應生成有機質和色素，完成土壤芳香族化合物循環，用于土壤環境修復。

產品型號：BC0110

更新時間：2024-07-09

廠商性質：生產廠家

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生化檢測試劑盒-常量法

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產品介紹

土壤多酚氧化酶（S-PPO）活性檢測試劑盒說明書詳見附件
可見分光光度法
貨號: BC0110
規格: 50T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規格	保存條件
試劑一	粉劑×2瓶	2-8℃保存
試劑二	液體10 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑三	液體 100 mL×1瓶（自備）	2-8℃保存
標準液	液體10 mL×1瓶	2-8℃保存

產品說明：
S-PPO主要來源于土壤微生物、植物根系分泌物及動植物殘體分解釋放，催化土壤中芳香族化合物氧化成醌，醌與土壤中蛋白質、氨基酸、糖類、礦物等物質反應生成有機質和色素，完成土壤芳香族化合物循環，用于土壤環境修復。
S-PPO能夠催化鄰苯三酚產生紫色沒食子素，后者在430nm有特征光吸收。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）

新鮮土樣自然風干或37℃烘箱風干，過30~50目篩。

測定步驟
1、可見分光光度計預熱30min以上，調節波長至430nm，試劑三調零。
2、標準液稀釋：用0.5mol/L HCl溶液將標準液稀釋至0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0.003125、0 mg/mL。試驗中需標準品1000µL。
3、標準液稀釋表：

序號	稀釋前濃度（mg/mL）	標準液體積（µL）	0.5mol/L HCl體積（µL）	稀釋后濃度（mg/mL）
1	0.2	1000	0	0.2

2	0.2	1000	1000	0.1
3	0.1	1000	1000	0.05
4	0.05	1000	1000	0.025
5	0.025	1000	1000	0.0125
6	0.0125	1000	1000	0.00625
7	0.00625	1000	1000	0.003125
8	-	0	1000	0

備注：實驗中每個標準管需要1mL標準溶液。
4、標準曲線的建立：以0 mg/mL標準液調零，取1mL稀釋好的標準液于1mL玻璃比色皿中在430nm處測定吸光值A，根據吸光度（x）和濃度（y，mg/mL）做出標準曲線。
5、操作表：

試劑名稱	測定管
風干土樣（g）	0.05
試劑一（μL）	500
振蕩混勻，30℃水浴反應1h
試劑二（μL）	200
試劑三（μL）	1750

振蕩數次，室溫靜置30min，取1mL上層液于1mL玻璃比色皿中，430nm處測定吸光值A。

S-PPO活性計算
根據標準曲線，將樣本吸光值A（x）帶入公式中，計算出樣本濃度y（mg/mL）。
單位的定義：每天每g土樣中產生1mg紫色沒食子素定義為一個酶活力單位。
S-PPO活性（U/g 土樣）=y×V提取相÷W÷T=840×y
T：反應時間，1h=1/24d；V提取相：1.75mL；W：樣本質量，0.05g。
相關發表文獻：

B Li,Y Ding, X Tang,et al. MTA1 promotes the invasion and migration of pancreatic cancer cells potentially through the HIF-α/VEGF pathway. Journal of Receptor and Signal Transduction Research. August 2018;(IF2.998)

參考文獻：
[1] Montgomery M W, Sgarbieri V C. Isoenzymes of banana polyphenol oxidase[J]. Phytochemistry, 1975, 14(5-6): 1245-1249.
[2] Dogan S, Dogan M. Determination of kinetic properties of polyphenol oxidase from Thymus (Thymus longicaulis subsp. chaubardii var. chaubardii)[J]. Food chemistry, 2004, 88(1): 69-77.
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